Yleiskatsaus
Ikatibanttiasetaatti on Shiren kehittämä hemangioidisen angioman (HAE) sairauskohtainen hoito, joka sai FDA:n hyväksynnän 25. elokuuta 2011 perinnöllisen angioedeeman akuuttien jaksojen hoitoon 18-vuotiailla ja sitä vanhemmilla aikuisilla. Se on myös kolmas lääke, jonka FDA on hyväksynyt HAE-hyökkäysten hoitoon. Ikatibanttiasetaatilla on samanlainen rakenne kuin bradykiniinin kaltaisella d-dekapeptidillä, mutta se sisältää viisi ei-proteiiniperäistä aminohappoa. Se toimii tehokkaana, selektiivisenä kilpailevana bradykiniinin tyypin 2 (B2) reseptoreiden antagonistina, mikä lievittää paikallista turvotusta, tulehdusta ja kipua, joka liittyy HAE-episodeihin estämällä bradykiniinin vaikutuksia. HAE edustaa vain yhtä useista mahdollisista indikaatioista, joihin ikatibantti voidaan osoittaa; muita mahdollisia käyttökohteita ovat astma, maksakirroosi ja muun tyyppiset angioedeema. Näin ollen ikatibanttiasetaatilla on merkittävää terapeuttista arvoa ja laajat markkinanäkymät.
Kemiallinen rakennekaavaIkatibanttiasetaatti
EolennaistaIn tiedot
kiinalainen nimi:醋酸艾替班特
Englanninkielinen nimi: Ikatibanttiasetaatti
Yrityksen tunnus：GT-F005
CAS：138614-30-9；130308-48-4
Ssarjanumero：H-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Molekulaarinen kaava：C59H89N19O13S
Molekyylipaino：1304.52
Ikatibanttiasetaatti MS-spektri
Synteettinen reitti
1: Fmoc-Arg(Pbf)-CTC-hartsin valmistus
Lisää 11,1 g 2-klooritrifenyylimetyylikloridihartsia, jonka substituutionopeus on 0,9 mmol/g, kiinteän faasin reaktiokolonniin, minkä jälkeen lisätään DMF:llä turvotettua hartsia 30 minuutin ajan. Lisää 3,50μL DIPEA:ta 12,98 g:aan Fmoc-Arg(Pbf)-OH:ta ja aktivoida 5 minuuttia; lisää sitten DMF:llä turvotettu hartsi ja anna seoksen saavuttaa tasapaino 10 minuutin kuluttua. Lisää vielä 3,50μL DIPEA:ta, anna reagoida huoneenlämmössä 45 minuuttia ja lopuksi sulje metanolilla 20 minuutin ajan. Haihduta reaktioseos, pese kolme kertaa DMF:llä, kolme kertaa DCM:llä ja sitten supista kolme kertaa metanolilla 3 minuuttia, 5 minuuttia ja 8 minuuttia, jolloin saadaan Fmoc-Arg(Pbf)-CTC-hartsi, jonka mitattu substituutionopeus on 0,5 mmol/g.
2：Kytkentä / Fmoc-Oic-VOI
Punnitse 10 mmol Fmoc-Arg (Pbf)-CTC-hartsia ja lisää se kiinteäfaasireaktoriin, turvota sitä DMF:ssä 0,5 tuntia, sitten poista Fmoc-suoja kahdesti käyttämällä 20-prosenttista DBLK-liuosta 10 minuutin ja 5 minuutin ajan; pesun jälkeen konjugoi se Fmoc-Oic-OH:lla. Liuota 11,73 g Fmoc-Oic-OH:ta, 4,9 g HOBt:a ja 6,1 ml DIC:tä DCM:ään (pieni määrä DMF:a voidaan lisätä liukenemista varten), aktivoi seos jäävesihauteessa 7 minuutin ajan, siirrä se sitten kiinteän faasin reaktoriin ja anna reagoida huoneenlämmössä 1 minuutin ajan.–2 h. Reaktion päätepiste määritetään indantronimenetelmällä. Kun reaktioseos on valmis, ime reaktioseos, pese DMF:llä, poista Fmoc-suoja kahdesti käyttämällä 20-prosenttista DBLK-liuosta 10 minuutin ja 5 minuutin ajan, pese uudelleen ja valmistaudu kytkemiseen seuraavan aminohapon kanssa.
3：Kytkentä / Fmoc-D-Cit-VOI
Liuota 11,91 g Fmoc-D-Cit-OH:ta, 5,00 g HOAt:a ja 11,4 g HATU:ta DCM:ään (johon on lisätty pieni määrä DMF:ää liukenemista varten). Lisää 3,87 g DIPEA:ta jäävesihauteessa ja aktivoi 7 minuuttia; siirrä seos sitten kiinteän faasin reaktoriin ja anna reagoida huoneenlämpötilassa 1 minuutin ajan–2 tuntia. Reaktion päättyminen määritetään indiolimenetelmällä. Reaktion jälkeen poista reaktioseos, pese DMF:llä ja poista Fmoc-suoja käyttämällä 20-prosenttista DBLK-liuosta. Valmistaudu pesun jälkeen kytkemiseen seuraavan aminohapon kanssa.
4：Kytkentä / Fmoc-Ser(tBu)-VOI
Liuota 11,49 g Fmoc-Ser(tBu)-OH:ta, 5,00 g HOAt:a ja 6,1 ml DIC:tä DCM:ään (johon on lisätty pieni määrä DMF:ää liukenemista varten). Kun on aktivoitu jäävesihauteessa 7 minuuttia, siirrä seos kiinteäfaasireaktoriin ja anna reagoida huoneenlämpötilassa 1–2 tuntia; reaktion päättyminen määritetään indiolimenetelmällä. Kun reaktioseos on valmis, poista reaktioseos, pese DMF:llä, poista sitten Fmoc-suoja käyttämällä 20-prosenttista DBLK-liuosta, mitä seuraa pesu ennen kuin siirryt kytkemiseen seuraavan aminohapon kanssa.
5：Kytkentä / Fmoc-Thi-VOI
Liuota 11,79 g Fmoc-Thi-OH:ta, 5,00 g HOBt:tä ja 11,37 g HBTU:ta DCM:ään (johon on lisätty pieni määrä DMF:ää liukenemista varten). Lisää 3,87 g DIPEA:ta jäävesihauteessa ja aktivoi 7 minuuttia; siirrä seos sitten kiinteän faasin reaktoriin ja anna reaktion huoneenlämpötilassa 1 °C–2 tuntia. Reaktion päättyminen määritetään indiolimenetelmällä. Reaktion jälkeen poista reaktioseos, pese DMF:llä ja poista Fmoc-suoja käyttämällä 20-prosenttista DBLK-liuosta. Valmistaudu pesun jälkeen kytkemiseen seuraavan aminohapon kanssa.
6：Kytkentä / Fmoc-Gly-VOI
Liuota 8,91 g Fmoc-Gly-OH:ta, 5,00 g HOBt:tä ja 9,63 g TBTU:ta DCM:ään (johon on lisätty pieni määrä DMF:ää liukenemista varten). Lisää 3,63 g TMP:tä jäävesihauteessa ja aktivoi 7 minuuttia; siirrä seos sitten kiinteän faasin reaktoriin ja anna reaktion huoneenlämpötilassa 1 °C–2 tuntia. Reaktion päättyminen määritetään indanonimenetelmällä. Reaktion jälkeen poista reaktioseos, pese DMF:llä ja poista Fmoc-suoja käyttämällä 20-prosenttista DBLK-liuosta. Valmistaudu pesun jälkeen kytkemiseen seuraavan aminohapon kanssa.
7：Kytkentä / Fmoc-Hyp(tBu)-VOI
Liuota 12,27 g Fmoc-Hyp(tBu)–VOI, 5,00 g HOAt:a ja 9,66 g TATU:ta DCM:ssä (johon on lisätty pieni määrä DMF:ää liuottamista varten). Lisää 3,63 g TMP:tä jäävesihauteessa ja aktivoi 7 minuuttia; siirrä seos sitten kiinteän faasin reaktoriin ja anna reagoida huoneenlämpötilassa 1 minuutin ajan–2 tuntia. Reaktion päätepiste määritetään indiolimenetelmällä. Kun reaktioseos on suoritettu loppuun, poista reaktioseos, pese DMF:llä ja poista Fmoc-suoja käyttämällä 20-prosenttista DBLK-liuosta. Valmistaudu pesun jälkeen kytkemiseen seuraavan aminohapon kanssa.
8：Kytkentä / Fmoc-Pro-VOI
Liuota 10,11 g Fmoc-Pro-OH:ta, 5,00 g HOAt:a ja 11,4 g HATU:ta DCM:ään (johon on lisätty pieni määrä DMF:ää liukenemista varten). Lisää 3,87 g DIPEA:ta jäävesihauteessa ja aktivoi 7 minuuttia; siirrä seos sitten kiinteän faasin reaktoriin ja anna reagoida huoneenlämpötilassa 1 minuutin ajan–2 tuntia. Reaktion päätepiste määritetään indiolimenetelmällä. Kun reaktioseos on valmis, poista reaktioseos, pese DMF:llä ja poista Fmoc-suoja käyttämällä 20 % DBLK:ta. Pesun jälkeen valmistaudu kytkentään seuraavan aminohapon kanssa.
9：Kytkentä / Fmoc-Arg (Pbf)-VOI
Liuota 19,44 g Fmoc-Arg(Pbf)-OH:ta, 5,00 g HOAt:a ja 11,4 g HATU:ta DCM:ään (johon on lisätty pieni määrä DMF:ää liukenemista varten). Lisää 3,87 g DIPEA:ta jäävesihauteessa ja aktivoi 7 minuuttia; siirrä seos sitten kiinteän faasin reaktoriin ja anna reagoida huoneenlämpötilassa 1 minuutin ajan–2 tuntia. Reaktion päättyminen määritetään indiolimenetelmällä. Reaktion jälkeen poista reaktioseos, pese DMF:llä ja poista Fmoc-suoja käyttämällä 20-prosenttista DBLK-liuosta. Valmistaudu pesun jälkeen kytkemiseen seuraavan aminohapon kanssa.
10：Kytkentä / Fmoc-D-Arg (Pbf)-VOI
Liuota 19,44 g Fmoc-D-Arg(Pbf)-OH:ta, 5,00 g HOAt:a ja 11,4 g HATU:ta DCM:ään (johon on lisätty pieni määrä DMF:ää liukenemista varten). Lisää 3,87 g DIPEA:ta jäävesihauteessa ja aktivoi 7 minuuttia; siirrä seos sitten kiinteän faasin reaktoriin ja anna reagoida huoneenlämpötilassa 1 minuutin ajan–2 tuntia. Reaktion päätepiste määritetään indiolonimenetelmällä. Kun reaktioseos on valmis, poista reaktioseos, pese DMF:llä ja käytä sitten 20-prosenttista DBLK:ta Fmoc-suojan poistamiseen. Pese kolme kertaa DMF:llä, kolme kertaa DCM:llä ja kolme kertaa metanolilla supistamista varten (3 minuuttia, 5 minuuttia ja 8 minuuttia vastaavasti), mitä seuraa tyhjiökuivaus etibanttipeptidiasetaattihartsin saamiseksi.
Ikatibanttiasetaatin HPLC-kromatogrammi
11：Ikatibanttiasetaatin hartsipyrolyysi
Valmista 200 ml lyysireagenssia, joka sisältää 190 ml trifluorietikkahappoa, 6 ml tri-isopropyylisilaania ja 4 ml vettä, ja esijäähdytä sitä jääkaapissa 30 minuuttia. Lisää 20,0 g etibanttipeptidiasetaattihartsia 500 ml:n pyöreäpohjaiseen pulloon ja lisää sitten valmistettu 200 ml:n lyysireagenssi hartsiin samalla sekoittaen jäähauteessa ja typpivirtauksen alla. 30 minuutin reaktion jälkeen poista jäähaude ja jatka reaktiota huoneenlämpötilassa 2 tuntia. Suodata hartsi ja kerää suodos. Pese hartsi pienellä määrällä trifluorietikkahappoa, suodata ja yhdistä suodokset. Lisää suodos vähitellen 20 litraan jääkylmää eetteriä; muodostuu valkoinen sakka. Sentrifugoi nopeudella 3 000 rpm sakkan keräämiseksi, pese viisi kertaa jääkylmällä eetterillä ja kuivaa alennetussa paineessa, jolloin saadaan 10,3 g raakaa peptidiä, jonka HPLC-puhtaus on > 90 %.
